Benavides-Bernal Santiago 1


1 Estudiante de la Maestría en Agricultura Tropical Sostenible, Universidad Zamorano

1. Introducción

De la familia de las pasifloráceas, el maracuyá (Passiflora edulis), una especie nativa de Brasil, representa mayor importancia económica (Bernacci et al., 2008). Este cultivo se enfrenta a diferentes enfermedades, entre ellas la antracnosis. Esta enfermedad puede afectar tallos, flores y frutos de la planta, se manifiesta en forma de manchas acuosas rodeadas de un aro verde oscuro que finalmente produce necrosis del tejido vegetal (Instituto Colombiano Agropecuario, 2011).

El agente causal de esta enfermedad corresponde a un hongo fitopatógeno del género Colletotrichum. Este es un género de hongos que causa enfermedades en una gran variedad de plantas leñosas y herbáceas (Dean et al., 2012). En general, las especies de Colletotrichum han sido responsables de pérdidas alarmantes tanto en cosecha como poscosecha de frutas en los últimos años (da Silva et al., 2020). En el cultivo de maracuyá reviste gran importancia económica. Este hongo presenta dos fases durante la colonización a la planta: fase biotrófica, de corta duración y la fase tardía necrotrófica (Instituto Colombiano Agropecuario, 2011).A este hongo se le debe prestar especial atención ya que puede afectar la pulpa y momificar el fruto.

2. Objetivos

  • Describir los principales síntomas causados por la enfermedad de la antracnosis en frutos de maracuyá.

  • Identificar caracteristicas biológicas, tamaños y estructuras reproductivas del hongo fitopatógeno causante de la antracnosis.

3. Metodología

El presente trabajo, se llevó a cabo en el Laboratorio de Fitopatología, Diagnóstico e Investigación Molecular de la Universidad Zamorano. Se colectaron 3 muestras de material vegetal del cultivo de maracuyá (Passiflora edulis) en los lotes del área productiva que se conoce como “Orgánica”, de la Universidad Zamorano. Las muestras se tomaron en las siguientes localización: 14°00’95’’ Norte con 87°00’27’’ Oeste a 773.8 m.s.n.m (Figura 1).

Figura 1. Ubicación geográfica de las colección de la muestras.

Una vez colectadas las muestras, se realizó la disposición en bolsas plásticas esterilizadas de cierre hermético. Se realizó la identificación de síntomas de la enfermedad en el fruto a través del estereoscopio. Se prepararon improntas a partir de la zona afectada del fruto. Dichas improntas fueron colocadas sobre un portaobjetos al que previamente se le había adicionado sobre su superficie una gota de azul de lactofenol. La observación microscópica se realizó con el lente 10x y 40x.

Bajo condiciones asépticas, se prepararon 12 explantes del tejido enfermo de 5 mm2 aproximadamente. Dicho material fue sumergido durante 3 minutos en una solución de hipoclorito de sodio al 3%. Luego, fueron transferidos a un beaker con agua destilada estéril y se sumergieron durante 2 minutos, el procedimiento mencionado se repitió 2 veces. Para el aislamiento de fitopatógenos, como condición nutricional, se utilizó el medio de cultivo Papa Dextrosa Agar (PDA, siglas en inglés), marca Criterion, el medio Agar Nutriente (AN) y Medio Completo para Hongos (MCH). Se dispusieron en 3 cajas Petri de 90 x 15 mm, en cada caja se colocó 4 explantes distribuidos uniformemente. Los aislamientos fueron sometidos a incubación a 28°C durante ocho días. Los platos de la siembra fueron monitoreados a los 2 y 4 días después de la siembra.

Finalmente, se realizó una nueva siembra en 3 cajas Petri de 50 x 15 mm para purificar las muestras, implementando un fragmento de 5 mm2 aproximadamente del cultivo anterior y utilizando el mismo medio de cultivo, PDA. El cultivo se monitoreó a los 8 días después de la siembra. Finalmente en un portaobjetos se realizó un montaje para observación en microscopio con el lente 10x, 40x y 100x.

4. Resultados y discusión

4.1. Análisis de sintomatología de la enfermedad

En el fruto, se observaron lesiones circulares de color marrón a marrón oscuro, hundimiento de la lesión y una posible esporulación del hongo fitopatógeno (Figura 2). Estos hallazgos son muy similares a los reportados en un estudio realizado por Carreño-Toala y colaboradores (2021), donde efectuaron la inoculación de Colletotrichum spp sobre frutos de maracuyá (Passiflora edulis) y papaya (Carica papaya). Las observaciones realizadas y lo encontrado en la literatura científica, sugerieron que muy posiblemente la enfermedad correspondiera a la antracnosis, que es ocasionada por un agente causal del género Colletotrichum. Figura 2. Síntomas de la enfermedad de la antracnosis (a, observados en campo; b, observación en laboratorio) observados en campo y en laboratorio.

4.2. Observaciones en los primeros aislamientos

Respecto a la morfología de la colonia, tanto en las 48 horas como en las 96 horas, se observa un crecimiento radial. En el anverso, especialmente en el medio PDA se observa una coloración rosa pálido tornándose a color naranja en el punto del inóculo (Figura 3), esta coloración se da en su masa colonial, algo muy característico de los hongos del género Colletotrichum (Truong et al., 2016).

Figura 3. Evolución de la colonización del hongo en los medios de cultivo (a, 48 horas después de la siembra; b, 96 horas después de la siembra).

4.2. Hallazgos en el reaislamiento del organismo fitopatógeno

En el reaIslamiento se formó un micelio de coloración blanco grisáceo, este micelio tendía a ser ligeramente algodonoso. Asimismo, se evidenciaron masas de conidios de coloración naranja formando círculos concéntricos. En la observación microscópica a 10x y 40x, se observó claramente las conidios del hongo. Estos, presentaron una forma cilíndrica, muy característica de los hongos del género en estudio (Carreño-Toala et al., 2021).

Figura 4. Purificación del inóculo en medio PDA (a, 96 horas despúes de la siembra; b, observación de conidias a 10x; c, observación de conidias a 40x).

Conclusiones

Los hallazgos en este estudio indican que el agente causal es del género Colletotrichum según la evidencia reportada. Muy posiblemente sea la especie gloeosporioides. Sin embargo, es necesario realizar pruebas moleculares para validar dicha hipótesis.

Referencias

Bernacci, L. C., Soares-Scott, M. D., Junqueira, N. T. V., Passos, I. R. D. S., & Meletti, L. M. M. (2008). Passiflora edulis Sims: the correct taxonomic way to cite the yellow passion fruit (and of others colors). Revista Brasileira de Fruticultura, 30(2), 566–576. https://doi.org/10.1590/S0100-29452008000200053

Carreño-Toala, J., Sánchez, L., Guzmán-Cedeño, Á., Suarez-Palacios, C., & Vélez-Zambrano, S. (2021). Efecto in vitro de fungicidas para el control de Colletotrichum SPP., en frutales Manabí - Ecuador. CIENCIA UNEMI, 14(35), 37–42. https://doi.org/10.29076/issn.2528-7737vol14iss35.2021pp37-42p.

da Silva, L. L., Moreno, H. L. A., Correia, H. L. N., Santana, M. F., & de Queiroz, M. V. (2020). Colletotrichum: species complexes, lifestyle, and peculiarities of some sources of genetic variability. Applied Microbiology and Biotechnology, 104(5), 1891–1904. https://doi.org/10.1007/S00253-020-10363-Y.

Dean, R., Van Kan, J. A. L., Pretorius, Z. A., Hammond-Kosack, K. E., Di Pietro, A., Spanu, P. D., Rudd, J. J., Dickman, M., Kahmann, R., Ellis, J., & Foster, G. D. (2012). The Top 10 fungal pathogens in molecular plant pathology. Molecular Plant Pathology, 13(4), 414–430. https://doi.org/10.1111/J.1364-3703.2011.00783.X.

Instituto Colombiano Agropecuario (2011). El cultivo de maracuyá pasiflora edulis en temporada invernal. https://www.ica.gov.co/getattachment/a814b577-c0c0-4369-8ecd-4f01f971cf99/El-cultivo-de-maracuya-en-temporada-invernal.aspx.

Truong, H. H., Sato, T., Ishikawa, S., Minoshima, A., Nishimura, T., & Hirooka, Y. (2016). Three colletotrichum species responsible for anthracnose on synsepalum dulcificum (Miracle fruit). International Journal of Phytopathology, 7(3), 89–101. https://doi.org/10.33687/phytopath.007.03.2658.

Descripción morfológica del agente causal de la antracnosis en maracuyá (Passiflora edulis).