El Poli-3-hidroxibutirato (PHB) es un bioplástico biodegradable acumulado intracelularmente por bacterias como Cupriavidus necator bajo condiciones de estrés nutricional. Su síntesis ocurre en dos etapas metabólicamente distintas, lo que justifica dos reactores batch en serie. El caldo de cultivo entra a 30 °C en ambos reactores, coincidiendo con la temperatura óptima de operación.
La glucosa se metaboliza para maximizar la producción de biomasa activa. Una fracción menor se dirige al PHB asociado al crecimiento.
| Volumen | 418 m³ (incl. 10% sobrediseño) |
| Duración del batch | 15 h |
| [Glucosa]₀ | 20 g/L |
| [Biomasa]₀ | 0.1 g/L (inóculo) |
| T entrada caldo | 30 °C |
| T operación | 30 °C |
Con biomasa establecida y limitación de nitrógeno, la glucosa se canaliza hacia la síntesis y acumulación del polímero intracelular PHB.
| Volumen | 167 m³ (incl. 10% sobrediseño) |
| Duración del batch | 21 h |
| [Glucosa]₀ | 12 g/L |
| [Biomasa]₀ | 2.5 g/L (inoculada) |
| T entrada caldo | 30 °C |
| T operación | 30 °C |
En un reactor batch no hay flujo de entrada ni salida durante la operación. El sustrato se carga al inicio y la concentración de biomasa y producto evoluciona con el tiempo según la cinética metabólica. El balance de materia se formula como ecuación diferencial ordinaria (EDO) en función del tiempo.
La biomasa microbiana se representa por su fórmula empírica por átomo de carbono: CH₁.₇₄O₀.₄₆N₀.₁₉. La reacción global balanceada es:
En condiciones de limitación nutricional, el acetil-CoA excedente se polimeriza en PHB. La reacción neta es:
La demanda de oxígeno en la Ec. 2 (1.46 mol O₂/mol glucosa) es menor que en la Ec. 1 (2.77 mol O₂/mol glucosa), reflejando la menor oxidación del carbono al incorporarse en el polímero.
Ambas ecuaciones satisfacen la conservación de C, H, O y N. Los coeficientes fueron tomados de la literatura experimental de fermentación de Cupriavidus necator y validados con ajustes cinéticos de R² > 0.90.
| Ecuación | Reactivo | Productos principales | mol O₂/mol glucosa | Descripción |
|---|---|---|---|---|
| Ec. 1 | C₆H₁₂O₆ + 2.77 O₂ | Biomasa + PHB + H₂O | 2.77 | Crecimiento celular |
| Ec. 2 | C₆H₁₂O₆ + 1.46 O₂ | CO₂ + PHB + H₂O | 1.46 | Síntesis de PHB |
El modelo de Richards es una generalización del modelo logístico que permite representar curvas de crecimiento sigmoides con asimetría variable. El sistema de EDOs es:
El término α·(dX/dt) representa la formación de PHB asociada al crecimiento, mientras que kₚ·X es la formación no asociada (producción basal). Las EDOs se integran numéricamente con el método de Euler, Δt = 0.01 h.
| Parámetro | Símbolo | Valor | Unidades |
|---|---|---|---|
| Tasa máx. de crecimiento | μ_max | 0.1385 | h⁻¹ |
| Biomasa máx. sostenible | X_max | 2.4887 | g/L |
| Parámetro de forma (Richards) | v | 5.6332 | adimensional |
| Coef. PHB asociado al crecimiento | α | 0.2542 | g PHB / g X |
| Coef. PHB no asociado al crecimiento | kₚ | 0.0340 | g PHB / (g X · h) |
| Rendimiento biomasa/sustrato | Yₓ/ | 0.52 | g X / g S |
| Rendimiento PHB/sustrato (R1) | Yₚ/ | 0.30 | g PHB / g S |
En el segundo reactor la biomasa permanece constante (dX/dt ≈ 0). La velocidad de consumo de sustrato está inhibida a medida que el contenido intracelular de PHB aumenta:
| Parámetro | Símbolo | Valor | Unidades |
|---|---|---|---|
| Tasa específica máx. de consumo de S | q | 0.370 | g S / (g X · h) |
| Constante de saturación (Monod) | K | 0.880 | g/L |
| Rendimiento PHB/sustrato (R2) | Yₚ/ | 0.482 | g PHB / g S |
| Fracción máx. de PHB en biomasa | fₚₛₛ,max | 9.0 | g PHB / g X |
| Exponente de inhibición | β | 1.7 | adimensional |
En un reactor batch no hay corrientes de entrada ni salida. El balance diferencial es: d(C₀·V)/dt = r₀·V. A volumen constante: dC₀/dt = r₀. La integración del sistema de EDOs da la evolución temporal de todas las concentraciones.
1. Integración de las EDOs cinéticas hasta el tiempo final del batch (t = 15 h para R1, t = 21 h para R2).
2. Consumos y producciones totales por diferencia de estados finales e iniciales.
3. O₂, CO₂ y H₂O mediante coeficientes estequiométricos, convirtiendo primero la masa de glucosa a moles.
| Variable | Reactor 1 — Crecimiento | Reactor 2 — PHB |
|---|---|---|
| Glucosa inicial (g/L) | 20 | 12 |
| Glucosa final (g/L) | 17.498 | 0.008 |
| Glucosa consumida (kg/batch) | 1045.7 | 2002.6 |
| Biomasa inicial (g/L) | 0.1 | 2.5 |
| Biomasa final (g/L) | 0.7971 | 2.5 |
| Biomasa producida (kg/batch) | 291.4 | 0 (constante) |
| PHB final (g/L) | 0.3484 | 5.7801 |
| PHB producido (kg/batch) | 145.6 | 965.3 |
| O2 consumido (kg/batch) | 514.5 | 519.3 |
| CO2 producido (kg/batch) | — | 963.7 |
| H2O producida (kg/batch) | 400.5 | 594.7 |
El calor de reacción se determina mediante la Ley de Hess, aplicando las entalpías estándar de formación de todos los compuestos participantes:
| Compuesto | Fórmula | ΔH°ṥ (kJ/mol) | Fuente |
|---|---|---|---|
| Glucosa | C₆H₁₂O₆ | -1274.4 | NIST WebBook |
| Oxígeno molecular | O₂(g) | 0.0 | Referencia |
| Biomasa microbiana | CH₁.₇₄O₀.₄₆N₀.₁₉ | -91.2 | Battley, 1998 |
| PHB monómero | C₄H₆O₂ | -397.5 | Literatura bioquímica |
| Agua líquida | H₂O(l) | -285.83 | NIST WebBook |
| Dióxido de carbono | CO₂(g) | -393.51 | NIST WebBook |
La entalpía de formación de la biomasa se estima a partir de la entalpía de combustión promedio (~22 kJ/g de biomasa seca), ajustada a la fórmula empírica CH1.74O0.46N0.19. Este es el enfoque estándar en ingeniería de bioprocesos (Battley, 1998; Atkinson & Mavituna, 1991).
La chaqueta funciona como intercambiador entre el caldo (a 30 °C constante) y el agua de servicio. La ecuación de diseño es:
Para flujo en contracorriente la diferencia de temperatura logarítmica media es:
El coeficiente global se calcula como suma de resistencias térmicas en serie: 1/U = 1/hₒ + e/k + 1/hₒ. El valor adoptado conservadoramente es U = 800 W/(m²·K) para la chaqueta y U = 600 W/(m²·K) para el serpentín (menor coeficiente convectivo externo al sumergido en el caldo con agitación).
Para biorreactores cilíndricos con H/D = 1.5, el área de chaqueta disponible es el 85% de la superficie lateral.
| Volumen | 418 m³ (incl. 10% sobrediseño) |
| Diámetro D₁ | 7.079 m |
| Altura H₁ | 10.619 m |
| Área chaqueta disponible | 200.75 m² |
| Área chaqueta requerida | 243.48 m² |
| Estado | ⚠ INSUFICIENTE |
| Volumen | 167 m³ (incl. 10% sobrediseño) |
| Diámetro D₂ | 5.214 m |
| Altura H₂ | 7.821 m |
| Área chaqueta disponible | 108.9 m² |
| Área chaqueta requerida | 137.81 m² |
| Estado | ⚠ INSUFICIENTE |
El caldo entra a 30 °C. La chaqueta mantiene el sistema en ese setpoint removiendo el calor metabólico y mecánico continuamente:
En reactores de gran volumen (R1 = 418 m³, R2 = 167 m³) la superficie de chaqueta puede no ser suficiente para remover todo el calor generado, dado que el área de la chaqueta crece con D² mientras que el volumen crece con D³. Un serpentín interno helicoidalmente montado en el eje del agitador o en la pared interna aporta área de transferencia adicional aprovechando el flujo de caldo generado por la agitación.
Se adopta tubería estándar ASME de 2 pulgadas nominales (DN 50, Sch 40), acero inoxidable 316L, con los siguientes parámetros:
| Diámetro exterior del tubo (d_e) | 50.8 mm (2” nominal Sch 40) |
| Espesor de pared | 3 mm |
| Diámetro interior del tubo (d_i) | 44.8 mm |
| U serpentín (conservador) | 600 W/(m²·K) |
| Fracción de radio para hélice | 70% del radio interno del reactor |
| Paso entre espiras | 2.5 × d_e = 127 mm |
| LMTD (mismo que chaqueta) | 3.274 °C |
| Área chaqueta R1 | 200.75 m² |
| Área requerida R1 | 243.48 m² |
| Área faltante R1 | 42.73 m² → serpentín a cubrir |
| Área chaqueta R2 | 108.9 m² |
| Área requerida R2 | 137.81 m² |
| Área faltante R2 | 28.91 m² → serpentín a cubrir |
| Parámetro | Reactor 1 — Crecimiento (418 m³) | Reactor 2 — PHB (167 m³) |
|---|---|---|
| GEOMETRÍA DEL SERPENTÍN | — | — |
| Diámetro exterior tubo (mm) | 50.8 | 50.8 |
| Diámetro interior tubo (mm) | 44.8 | 44.8 |
| U serpentín (W/m²·K) | 600 | 600 |
| Radio hélice (m) | 2.478 | 1.825 |
| Paso entre espiras (mm) | 127 | 127 |
| Longitud por espira (m) | 15.568 | 11.466 |
| Área por espira (m²) | 2.485 | 1.83 |
| DIMENSIONAMIENTO | — | — |
| Área chaqueta disponible (m²) | 200.75 | 108.9 |
| Área chaqueta requerida total (m²) | 243.48 | 137.81 |
| Área faltante — asignada al serpentín (m²) | 42.73 | 28.91 |
| Área serpentín requerida (m²) | 56.98 | 38.55 |
| N° de espiras (1 hélice) | 23 | 22 |
| Altura del serpentín — 1 hélice (m) | 2.92 | 2.79 |
| Altura útil disponible (80% H) (m) | 8.5 | 6.26 |
| ¿Cabe 1 hélice? | Sí | Sí |
| N° espiras si 2 hélices paralelas | 12 | 11 |
| Altura serpentín — 2 hélices (m) | 1.52 | 1.4 |
| ¿Cabe con 2 hélices? | Sí | Sí |
| Configuración recomendada | 1 hélice | 1 hélice |
| Longitud total de tubo (m) | 358.1 | 252.3 |
| Área real del serpentín (m²) | 57.15 | 40.26 |
| VERIFICACIÓN FINAL | — | — |
| Área total (chaqueta + serpentín) (m²) | 257.9 | 149.16 |
| Área total requerida (m²) | 243.48 | 137.81 |
| Ratio A_total / A_req | 1.059 | 1.082 |
| Capacidad remoción chaqueta (kW) | 525.82 | 285.23 |
| Capacidad remoción serpentín (kW) | 112.26 | 79.09 |
| Capacidad remoción combinada (kW) | 638.08 | 364.32 |
| Calor total a remover (kW) | 637.74 | 360.95 |
| ¿Cumple el requerimiento? | ✓ SÍ CUMPLE | ✓ SÍ CUMPLE |
La combinación de chaqueta (U=800 W/m²·K) más serpentín interno (U=600 W/m²·K, tubería 2” DN50 Sch 40) permite cubrir la totalidad del área de transferencia requerida en ambos reactores. R1: área combinada = 257.9 m² vs. 243.5 m² requeridos. R2: área combinada = 149.2 m² vs. 137.8 m² requeridos.
El serpentín debe fabricarse en SS 316L (resistencia a ácidos orgánicos del medio de cultivo). El paso de 2.5×d_e evita zonas muertas de flujo y facilita la limpieza CIP. Se recomienda conectar el serpentín en paralelo con la chaqueta usando la misma línea de agua de servicio, con válvulas de control independientes para modular la fracción de caudal asignada a cada sistema según la carga térmica instantánea del batch.
El serpentín sumergido aprovecha la turbulencia generada por el agitador, logrando coeficientes convectivos en el lado del caldo similares a los de la chaqueta. Su instalación no modifica la geometría externa del reactor ni su presión de diseño, y puede reemplazarse sección por sección sin parar la planta completa.
En este análisis se evalúa qué ocurriría si los biorreactores operaran sin ningún sistema de intercambio de calor. Todo el calor generado por las reacciones biológicas y la agitación mecánica se acumula en el caldo, elevando su temperatura. El caldo entra a 30 °C en ambos reactores.
Sin intercambio de calor con el entorno, el balance de energía se reduce a la acumulación total:
| Parámetro | Reactor 1 — Crecimiento | Reactor 2 — PHB |
|---|---|---|
| T entrada del caldo (°C) | 30 | 30 |
| Masa de caldo (kg) | 418,000 | 167,000 |
| Cp caldo (J/kg·K) | 4000 | 4000 |
| Calor de reacción total (kJ/batch) | 580,083 | 8,350,295 |
| Calor de agitación total (kJ/batch) | 33,858,000 | 18,937,800 |
| Calor total acumulado (kJ/batch) | 34,438,083 | 27,288,095 |
| DeltaT adiabático analítico (°C) | 20.6 | 40.85 |
| T máxima adiabática analítica (°C) | 50.6 | 70.85 |
| T máxima adiabática simulada (°C) | 50.6 | 70.85 |
| Supera temperatura letal 40 °C? | SI — PROCESO INVIABLE | SI — PROCESO INVIABLE |
| Tiempo para alcanzar 40 °C (h) | 7.35 | 4.49 |
Sin sistema de enfriamiento, ambos reactores acumularían calor hasta superar los límites letales para Cupriavidus necator (~40 °C). La desnaturalización enzimática a esas temperaturas hace el proceso completamente inviable. El sistema de chaqueta no es opcional, es un requerimiento crítico de proceso.
Incluso antes de alcanzar la temperatura letal, el aumento de temperatura modifica la cinética: reduce la afinidad enzimática, altera el metabolismo de acumulación de PHB y puede inducir respuestas de estrés térmico que desvían el carbono hacia productos no deseados.
La chaqueta diseñada (U = 800 W/m²·K, agua 25-28 °C) más el serpentín interno (U = 600 W/m²·K) mantienen la temperatura del caldo en 30 °C durante todo el batch. El escenario adiabático muestra que la temperatura se dispararía muy por encima de los límites biológicos en pocas horas. Esta comparación cuantifica el valor crítico del sistema de integración térmica.
| Parámetro | Reactor 1 — Crecimiento | Reactor 2 — PHB |
|---|---|---|
| CONFIGURACION | — | — |
| Volumen reactor (m3) | 418 | 167 |
| Duracion batch (h) | 15 | 21 |
| Glucosa0 (g/L) | 20 | 12 |
| Biomasa0 (g/L) | 0.1 | 2.5 |
| T entrada caldo (C) | 30 | 30 |
| BALANCE DE MATERIA | — | — |
| Glucosa consumida (g/L) | 2.502 | 11.992 |
| Biomasa final (g/L) | 0.7971 | 2.5 |
| PHB producido (g/L) | 0.3484 | 5.7801 |
| O2 consumido (kg/batch) | 514.5 | 519.3 |
| CO2 producido (kg/batch) | — | 963.7 |
| H2O producida (kg/batch) | 400.5 | 594.7 |
| Masa PHB total (kg/batch) | 145.6 | 965.3 |
| BALANCE DE ENERGIA | — | — |
| DH rxn (kJ/mol glucosa) | -99.94 | -751.2 |
| Calor rxn (kJ/batch) | 580,083 | 8,350,295 |
| Potencia media rxn (kW) | 10.74 | 110.45 |
| Potencia agitacion (kW) | 627 | 250.5 |
| POTENCIA TOTAL A REMOVER (kW) | 637.74 | 360.95 |
| CHAQUETA DE ENFRIAMIENTO | — | — |
| Diametro reactor (m) | 7.079 | 5.214 |
| Altura reactor (m) | 10.619 | 7.821 |
| LMTD (C) | 3.274 | 3.274 |
| U global (W/m2·K) | 800 | 800 |
| Area chaqueta disponible (m2) | 200.75 | 108.9 |
| Area chaqueta requerida (m2) | 243.48 | 137.81 |
| FLUJO AGUA kg/s | 50.7837 | 28.7429 |
| FLUJO AGUA m3/h | 182.8215 | 103.4745 |
| SERPENTIN INTERNO | — | — |
| U serpentin (W/m2·K) | 600 | 600 |
| Radio helice (m) | 2.478 | 1.825 |
| N espiras | 23 | 22 |
| Long. total tubo (m) | 358.1 | 252.3 |
| Area real serpentin (m2) | 57.15 | 40.26 |
| AREA TOTAL chaq+serp (m2) | 257.9 | 149.16 |
| Configuracion recomendada | 1 hélice | 1 hélice |
| ANALISIS ADIABATICO | — | — |
| T maxima sin enfriamiento (C) | 50.6 | 70.9 |
| DeltaT adiabatico (C) | 20.6 | 40.9 |
| Supera T letal 40 C? | SI | SI |
Ambas reacciones consumen glucosa como única fuente de carbono (caldo a 30 °C de entrada). En R1, la glucosa se destina principalmente a biomasa (Y_X/S = 0.52 gX/gS). En R2, la biomasa permanece constante y la glucosa se canaliza hacia PHB con alto rendimiento (Y_P/S = 0.482 gPHB/gS). La demanda de O2 es mayor en crecimiento: 2.77 vs. 1.46 mol O2/mol glucosa.
El análisis demuestra que la chaqueta por sí sola puede ser insuficiente en reactores de este volumen. La incorporación de un serpentín helicoidal interno (tubería DN50 Sch 40, U=600 W/m²·K) complementa el área de transferencia hasta cubrir holgadamente el requerimiento. Área total R1: 257.9 m² | Área total R2: 149.2 m².
Instalar control PID sobre las válvulas de agua de enfriamiento de chaqueta y serpentín con sensor PT100 en el caldo. El serpentín en SS 316L con paso 2.5×d_e permite limpieza CIP sin desmontaje. Verificar la potencia específica de agitación (W/m3) en función de la reología en R2, donde la alta concentración de PHB puede incrementar la viscosidad aparente.
Este análisis cubre exclusivamente el sistema de control de temperatura: chaqueta de enfriamiento + serpentín interno + sistema de bombeo y utilidades. Los parámetros de precio son editables en el chunk setup. Moneda: USD | Batches por año: 200 | Vida útil del sistema: 15 años | WACC: 8% | Base de precios: mercado latinoamericano 2024.
<div class="t-lbl">CAPEX Total Sistema</div>
<div class="t-val">USD 950,638</div>
<div class="t-sub">Incl. EPC (1.2×)</div>
<div class="t-lbl">OPEX Anual</div>
<div class="t-val">USD 39,011</div>
<div class="t-sub">Agua + Energía + Mant. + M.O.</div>
<div class="t-lbl">Costo Total Anualizado</div>
<div class="t-val">USD 150,073</div>
<div class="t-sub">CAPEX amortizado + OPEX</div>
<div class="t-lbl">Costo por kg PHB</div>
<div class="t-val">USD 0.675</div>
<div class="t-sub">Solo imputación del sistema térmico</div>
El CAPEX se estima con el método de factores de Lang. El costo base de cada equipo (m² de chaqueta o m lineal de serpentín) se multiplica por factores que incluyen: ingeniería de detalle, gestión de compras, fabricación, transporte, montaje mecánico, pruebas hidráulicas e instrumentación básica.
| Chaqueta — material + fabricación base | USD 170,638 |
| Chaqueta — factor instalación (1.35×) | USD 230,361 |
| Área chaqueta R1 | 200.8 m² × USD 850/m² |
| Serpentín — material + fabricación base | USD 150,392 |
| Serpentín — factor instalación (1.4×) | USD 210,548 |
| Longitud serpentín R1 | 358.1 m × USD 420/m |
| Sistema bombeo + control R1 | USD 35,000 |
| Subtotal R1 (sin EPC) | USD 475,909 |
| Chaqueta — material + fabricación base | USD 92,563 |
| Chaqueta — factor instalación (1.35×) | USD 124,960 |
| Área chaqueta R2 | 108.9 m² × USD 850/m² |
| Serpentín — material + fabricación base | USD 105,949 |
| Serpentín — factor instalación (1.4×) | USD 148,329 |
| Longitud serpentín R2 | 252.3 m × USD 420/m |
| Sistema bombeo + control R2 | USD 25,000 |
| Subtotal R2 (sin EPC) | USD 298,289 |
El OPEX se calcula para 200 batches/año. El agua de enfriamiento recircula en circuito cerrado con torre; solo se cobra la reposición por evaporación y purgas (5% del volumen circulado). La energía eléctrica incluye únicamente las bombas del sistema de frío (P = 27.6 kW), no la agitación de los reactores.
| Concepto | Monto (USD) |
|---|---|
| ── INVERSIÓN (CAPEX) ────────────────── | — |
| Chaqueta R1 — base fabricación | USD 170,638 |
| Chaqueta R1 — instalada (factor Lang) | USD 230,361 |
| Serpentín R1 — base fabricación | USD 150,392 |
| Serpentín R1 — instalado (factor Lang) | USD 210,548 |
| Chaqueta R2 — base fabricación | USD 92,563 |
| Chaqueta R2 — instalada (factor Lang) | USD 124,960 |
| Serpentín R2 — base fabricación | USD 105,949 |
| Serpentín R2 — instalado (factor Lang) | USD 148,329 |
| Sistema bombeo + control R1 | USD 35,000 |
| Sistema bombeo + control R2 | USD 25,000 |
| Líneas, manifolds, aislamiento (común) | USD 18,000 |
| CAPEX equipos (subtotal) | USD 792,198 |
| Overhead EPC (factor) | 1.2× → +USD 158,440 |
| CAPEX TOTAL | USD 950,638 |
| CAPEX amortizado por año (anualidad) | USD 111,063/año (8% en 15 años) |
| ── OPERACIÓN (OPEX ANUAL) ──────────── | — |
| Agua de enfriamiento (reposición) | USD 17,204/año (11.5%) |
| Energía eléctrica bombeo | USD 8,450/año (5.6%) |
| Mantenimiento chaqueta (1.5% CAPEX) | USD 5,330/año |
| Mantenimiento serpentín (2.0% CAPEX) | USD 7,178/año |
| Mano de obra operación | USD 850/año |
| OPEX TOTAL ANUAL | USD 39,011/año |
| ── COSTO TOTAL ANUALIZADO ───────────── | — |
| Costo total por año | USD 150,073/año |
| Costo por batch | USD 750.37/batch |
| Costo por kg de PHB producido | USD 0.675/kg PHB |
El CAPEX total del sistema de intercambio térmico es USD 950,638, amortizado en 15 años a 8% resulta en USD 111,063/año. El OPEX anual de USD 39,011 está dominado por el mantenimiento y la energía de bombeo. El costo total imputable al sistema térmico es USD 0.675 por kg de PHB producido, lo que representa una fracción menor del costo de producción total del bioplástico (~8–15 USD/kg en instalaciones industriales).
Los precios unitarios corresponden a estimaciones de orden de magnitud (Clase V, ±40%). Para licitación real se requiere ingeniería de detalle (FEED) y cotizaciones formales con fabricantes. El costo no incluye: reactor base, sistema de aireación, control de pH, fermentación, downstream processing ni costos de materia prima. La tarifa de agua asume sistema de recirculación con torre de enfriamiento; agua de pozo o río reduce el costo ~60%.
A 200 batches/año el costo total anualizado del sistema de frío es USD 150,073. Considerando que el PHB industrial se vende a 3–8 USD/kg, la contribución del sistema térmico (USD 0.675/kg) es económicamente justificada y técnicamente necesaria para viabilizar el proceso. El CAPEX de chaqueta y serpentín representa la mayor parte de la inversión (~75% del total).