Meio rico e meio definido (mínimo)

Meios ricos são aqueles que contêm uma grande variedade de nutrientes e outras substâncias necessárias para o crescimento e reprodução de bactérias. Eles geralmente incluem aminoácidos, sais minerais, vitaminas e outros componentes que fornecem as condições ideais para o crescimento de uma variedade de bactérias.

Meios mínimos, por outro lado, contêm apenas os nutrientes essenciais e as condições mínimas necessárias para o crescimento de uma bactéria específica. Eles são usados para identificar as necessidades nutricionais de uma bactéria e para estudar sua biologia.

Alguns exemplos de meios ricos incluem meio de nutrientes completos (Luria-Bertani), meio de nutrientes geral (NB) e meio de caldo de frango (TSB). Já alguns exemplos de meios mínimos incluem o meio de M9 (utilizado para a cultura de bactérias como E.coli) e o meio de Davis (utilizado para a cultura de bactérias do gênero Streptococcus).

Macro e micronutientes

Os macronutrientes são nutrientes essenciais em grandes quantidades para o crescimento e reprodução de bactérias. Eles incluem carbono, nitrogênio, fósforo e enxofre. O carbono é usado como fonte de energia e como matéria-prima para a construção de moléculas orgânicas, como carboidratos, lipídios e proteínas. O nitrogênio é necessário para a síntese de proteínas e ácidos nucléicos. O fósforo é importante para a formação de moléculas de adenosina trifosfato (ATP) e outros compostos energéticos. O enxofre é necessário para a síntese de proteínas e outros compostos orgânicos.

Os micronutrientes são nutrientes essenciais em pequenas quantidades para o crescimento e reprodução de bactérias. Eles incluem vitaminas, sais minerais e oligoelementos. As vitaminas são compostos orgânicos essenciais para a bactéria, incluindo as vitaminas do complexo B, vitamina C e vitamina K. Os sais minerais incluem cálcio, ferro e zinco. Os oligoelementos incluem cobre, iodo e selênio. Estes micronutrientes são necessários para uma variedade de funções biológicas, incluindo a síntese de proteínas, a geração de energia e a proteção contra os danos celulares.

Esterilização

Esterilização é o processo de eliminar microrganismos, incluindo bactérias, fungos e vírus, em um objeto ou material. A esterilização é importante para garantir a pureza de meios de cultura, instrumentos médicos e outros materiais que entram em contato com culturas vivas ou pacientes.

Existem vários métodos de esterilização, como calor, radiação e química. O método mais comum é a esterilização por calor, que pode ser realizada por meio de autoclave, óxido de etileno ou calor seco.

Veja a @sec-preparaMeio para acompanhar o passo a passo do preparo e esterelização do meio TGE.

É importante seguir as instruções do fabricante e monitorar regularmente a eficácia da esterilização, usando indicadores de esterilização.

1. Meios de cultura

   1. de onde vieram

   2. como foram elaborados, em que época

   3. necessidades metabólica das bactérias

   4. macronutirentes, micronutrientes

   5. meio seletivo, meio rico, meio mínimo.

   6. Conceitos de esterelização

2. Cultivo de bactérias

   1. Explicar crescimento bacteriano, UFC, clones,

   2. como calcular taxa de crescimento e tempo de geração com fórmulas

   3. Pensar se vale a pena falar sobre transcrição, tradução, utilizar o site PHET

3. Estrutura das bactérias e metabolismo bacteriano

   1. Livro da helo, aulas do gegório e marílis, livro marilis

   2. ATPase, ciclo krebs aberto, fechado, cadeia de transporte de eletrons, vídeos,

4. Preservação de bactérias na coleção do lab

   1. Conceitos de morte celular, mutações, produção de metabólitos secundários

5. Ostara

   1. Característica das bactérias utilizadas

      1. Outros produtos que bactérias são utilizadas

   2. conceitos dos conservantes

   3. conceitos das garantias

   4. Metabólitos produzidos

   5. Ações nas plantas

   6. Ação em nematóides

Estrutura das células bacterianas

As células bacterianas são as unidades estruturais e funcionais dos seres vivos mais simples e mais antigos existentes na Terra. Sua estrutura é simples, mas muito eficiente. Elas são procariontes, ou seja, não possuem núcleo delimitado por membrana nuclear.

A parede celular é a principal estrutura que dá forma e proteção à célula bacteriana. É composta principalmente por peptidoglicano, uma molécula de polissacarídeo-proteína que oferece rigidez à célula e a protege contra pressões osmóticas. Algumas bactérias possuem uma camada externa adicional chamada de camada lipídica, que os protege contra agentes antimicrobianos.

O citoplasma é o ambiente interno da célula bacteriana onde ocorrem todas as reações metabólicas. Ele é composto principalmente de água e contém enzimas, proteínas e outras moléculas orgânicas. O citoplasma contém também um orgão especializado chamado ribossomos, responsáveis pela síntese proteica.

As bactérias também possuem uma estrutura chamada de flagelo, que é responsável pela motilidade celular. Ele é composto por proteínas e é responsável por fazer com que a célula se mova. Algumas bactérias possuem também pili, estruturas curtas e finas que ajudam na aderência à superfícies e na troca de informações genéticas com outras bactérias.

Outra estrutura presente nas células bacterianas é o plasmídeo, que é um fragmento de DNA extra-genômico que contém informações importantes, como resistência a antibióticos e capacidade de degradar compostos orgânicos.

As bactérias também podem possuir orgãos como cílios e flagelos, que lhes permitem se mover e se deslocar através do meio para encontrar nutrientes e evitar predadores. Algumas bactérias possuem uma camada externa adicional chamada de camada lipídica, que os protege contra agentes antimicrobianos.

Em resumo, as células bacterianas possuem estruturas simples mas eficientes, como a parede celular, o citoplasma e os orgãos de motilidade. Essas estruturas permitem que as bactérias sejam capazes de se adaptar e sobreviver em diversos ambientes, incluindo a resistência a antimicrobianos.

Diluição seriada

1. Comece com um cultivo de bactérias em meio líquido e que concentração é desconhecida.

2. Retire uma alíquota de 1ml do cultivo de bactérias e adicione-a a 9ml de solução tampão estéril ou meio de cultura fresco, agitando bem para misturar.

3. Isso resultará em uma diluição de 10^-1 (1:10).

4. Repita o processo de adicionar 1ml dessa nova solução diluída a outra solução tampão estéril (ou meio de cultura fresco) para obter uma diluição de 10^-2 (1:100).

5. Continue repetindo o processo até obter as diluições desejadas. É importante identificar corretamente cada diluição.

6. Aplique uma alíquota de 100 𝝻l (0.1 ml) de cada diluição em placas de Petri com o meio de cultura estéril desejado.

7. Incube as placas de Petri a temperatura e condições adequadas para o crescimento da bactéria.

8. Contar o número de colônias que surgiram nas placas e usar essa informação para calcular a concentração de bactérias inicial na amostra original em UFC/ml.

Relação entre absorbância e UFC

1. Comece medindo a absorbância das amostras de bactérias com um espectrofotômetro de microplacas. Use a frequência de absorção adequada para a bactéria em questão.

2. Calcule a densidade óptica (OD) da amostra, dividindo a absorbância pela comprimento da célula (geralmente 1 cm).

3. Realize uma diluição seriada da amostra, usando o procedimento descrito anteriormente, e aplique uma alíquota de cada diluição em placas de Petri esterelizadas com o meio de cultura desejado.

4. Incube as placas de Petri a temperatura e condições adequadas para o crescimento da bactéria.

5. Contar o número de colônias que surgiram nas placas e usar essa informação para calcular a concentração de bactérias inicial na amostra original.

6. Calcule a contagem de unidades formadoras de colônias (UFC) dividindo a concentração de bactérias inicial pelo volume da alíquota aplicada nas placas.

7. Para converter a densidade óptica em UFC, é necessário estabelecer uma relação entre OD e UFC através de ensaios padronizados. Utilize essa relação para converter a OD da amostra em UFC.