Introducción

La rizósfera es una zona de compleja interacción entre la planta y los organismos del suelo. Los nematodos constituyen uno de los componentes numéricamente más importantes de la fauna del suelo, contribuyen significativamente en los procesos del suelo y ocupan posiciones claves en la red trófica del suelo como consumidores primarios, secundarios y/o terciarios, ya que se ubican en al menos cinco grupos funcionales: bacteriófagos, fitófagos, omnívoros, fungívoros y depredadores. Ellos interactúan con muchos organismos del suelo, consumen y son consumidos por otros componentes de la fauna del suelo. Los ensambles biológicos están organizados en función a las variables físicas y químicas del suelo y asociados además con la historia de manejo del cultivo. Dado que se cuenta con escasos antecedentes en la región sobre indicadores de calidad de suelo a través de la nematofauna del suelo en huertos con perales, se desea describir y comparar la situación de distintos lotes de pera.

zonas de estudio
zonas de estudio

¿Existe diferencia en la abundancia total de la población de nematodos?

-Inicialmente se analizó el conjunto de datos sin hacer diferencias entre las estaciones -

## p-valor = 0.21
## mean in group B mean in group M 
##             262             300
Entre estaciones
## p-valor = 0.48
##   mean in group abril mean in group octubre 
##                   292                   271

El t-test de comparación entre las chacras M y B o estaciones (abril=Otoño, octubre=Primavera) muestra que no existen diferencias significativas en la abundancia de los grupos. Esto sería suficiente si es que solo utilizamos una mirada de los registros de manera independiente, algo que considero que no sucede. Para mayor profundidad se decidio explorar los diferentes subconjuntos de muestras:

-Por estaciones y chacras-

Primavera

## p-valor = 0.0092
## mean in group B mean in group M 
##             206             305
Otoño

## p-valor = 0.87
## mean in group B mean in group M 
##             289             296

En el caso de los datos en Primavera sí se encuentran diferencias significativas entre las chacras, no así sucede en el Otoño.

De este analisis se puede observar que de manera global en el conjunto de los datos sin realizar discriminacion por estaciones las chacras no presentan diferencias significativas en la abundancia de nematodes. En el caso de diferenciar por estaciones los lotes presentan diferencias en Primavera donde los valores medios estimados son de 206.43 para el lote B y para el lote M.

¿Existe diferencia en la población de nematodos de cada grupo trófico entre lotes?

Para responder esta pregunta se trabajo con dos tecnicas diferentes, una de manera exploratoria a través de un analsis de cluster basado en ACP y por otro lado con un Analisis de Similitudes (ANOSIM) es una prueba estadística no paramétrica. Es a un ANOVA de un factor, pero con varias variables a comparar en los diferentes sitios.

Analisis de Cluster basado en ACP

## Kaiser-Meyer-Olkin factor adequacy
## Call: KMO(r = cor(datos[, 7:10]))
## Overall MSA =  0.61
## MSA for each item = 
## Bacteriofagos    Fungivoros     Omni.Pred     Fitofagos 
##          0.61          0.60          0.59          0.64

## 
## Link between the cluster variable and the quantitative variables
## ================================================================
##                Eta2  P-value
## Bacteriofagos 0.454 4.94e-09
## Omni.Pred     0.342 1.13e-06
## Fungivoros    0.226 1.44e-04
## 
## Description of each cluster by quantitative variables
## =====================================================
## $`1`
##               v.test Mean in category Overall mean sd in category Overall sd
## Fungivoros     -3.62             27.3         39.6          18.53       28.0
## Omni.Pred      -4.46             19.6         29.9           9.66       19.1
## Bacteriofagos  -5.13             44.9         71.9          18.43       43.6
##                p.value
## Fungivoros    2.98e-04
## Omni.Pred     8.32e-06
## Bacteriofagos 2.87e-07
## 
## $`2`
##               v.test Mean in category Overall mean sd in category Overall sd
## Bacteriofagos   5.13            103.9         71.9           43.2       43.6
## Omni.Pred       4.46             42.1         29.9           20.4       19.1
## Fungivoros      3.62             54.0         39.6           30.3       28.0
##                p.value
## Bacteriofagos 2.87e-07
## Omni.Pred     8.32e-06
## Fungivoros    2.98e-04
## 
##  1  2 
## 32 27

De este analisis exploratorio en el que se utilizó la variable “chacra” como suplementaria cualitativa se observa que utilizando las 3 primeras CP (83.97%) no se observan diferencias entre las chacras. Esto se puede ver en el plano coordenado que se representó. Desde el analisis de cluster, basandonos en estas 3 componentes, el agrupamiento que mayor inercia recoge es definido por 2 grupos. En estos, no se verifica que la variable cualitativa sea significativa para la diferenciacion de los grupos. La poblaciones que aportan significativamente a la diferenciacion de los grupos son se observa entre Bacteriofagos, Omni.Pred y Fungivoros, dejando muestras en el grupo 1 con valores medios en estas poblaciones por debajo del promedio global. El grupo 2 presenta el comportamiento simetrico.

Analisis de Similitudes (ANOSIM)

## 
## Call:
## anosim(x = matriz, grouping = datos$chacra, permutations = 9999,      distance = "bray") 
## Dissimilarity: bray 
## 
## ANOSIM statistic R: 0.0175 
##       Significance: 0.2 
## 
## Permutation: free
## Number of permutations: 9999
## 
## Upper quantiles of permutations (null model):
##    90%    95%  97.5%    99% 
## 0.0406 0.0597 0.0754 0.0988 
## 
## Dissimilarity ranks between and within classes:
##         0% 25% 50% 75% 100%   N
## Between  1 295 561 847 1127 572
## B        2 276 591 879 1128 325
## M        6 246 547 802 1101 231
## 
## Call:
## anosim(x = matriz, grouping = datos$mes, permutations = 9999,      distance = "bray") 
## Dissimilarity: bray 
## 
## ANOSIM statistic R: 0.0734 
##       Significance: 0.02 
## 
## Permutation: free
## Number of permutations: 9999
## 
## Upper quantiles of permutations (null model):
##    90%    95%  97.5%    99% 
## 0.0373 0.0554 0.0727 0.0931 
## 
## Dissimilarity ranks between and within classes:
##         0% 25% 50% 75% 100%   N
## Between  1 302 604 881 1128 576
## abril    2 241 460 770 1125 276
## octubre 16 304 570 826 1126 276

Se quitaron todos los puntos atipicos marcados por los boxplots. Al aplicarse el ANOSIM no se encontraron diferencias significativas entre las chacras ni entre estaciones en sus abundancias de los grupos troficos.

¿Existe relación entre estas variables biológicas (grupos tróficos de nematodos) y las propiedades del suelo?

El conjunto de datos presenta datos ausentes en las variables que describen las propiedades del suelo. Es por esto que se aplicó un metodo de imputacion por medio de un analisis del ACP iterativo (Kiers 1997), o también conocido como el algoritmo EM (Expectation Maximization) (Josse y Husson 2012).

Posterior a completar la base de datos, se aplicó un Cluster Jerarquico basado en ACP.

## 
## Link between the cluster variable and the categorical variables (chi-square test)
## =================================================================================
##         p.value df
## chacra 1.34e-07  1
## 
## Description of each cluster by the categories
## =============================================
## $`1`
##          Cla/Mod Mod/Cla Global  p.value v.test
## chacra=M   100.0    73.2     50 2.67e-08   5.56
## chacra=B    36.7    26.8     50 2.67e-08  -5.56
## 
## $`2`
##          Cla/Mod Mod/Cla Global  p.value v.test
## chacra=B    63.3     100     50 2.67e-08   5.56
## chacra=M     0.0       0     50 2.67e-08  -5.56
## 
## 
## Link between the cluster variable and the quantitative variables
## ================================================================
##          Eta2  P-value
## PSI     0.761 1.06e-19
## Nai     0.752 3.27e-19
## RAS     0.687 2.82e-16
## CE      0.669 1.52e-15
## SO4     0.665 2.13e-15
## CL      0.424 1.75e-08
## N.      0.415 2.75e-08
## C.      0.409 3.76e-08
## MO      0.409 3.88e-08
## Nitrato 0.176 8.39e-04
## pH      0.162 1.44e-03
## Ki      0.129 4.89e-03
## dap     0.066 4.74e-02
## 
## Description of each cluster by quantitative variables
## =====================================================
## $`1`
##         v.test Mean in category Overall mean sd in category Overall sd  p.value
## N.        4.95            0.172        0.161         0.0212     0.0248 7.41e-07
## C.        4.91            1.993        1.867         0.2460     0.2890 8.96e-07
## MO        4.91            3.428        3.211         0.4230     0.4970 9.13e-07
## Nitrato   3.22           43.039       38.033        17.2464    17.5144 1.26e-03
## dap      -1.97            0.929        0.988         0.3914     0.3385 4.84e-02
## Ki       -2.76            1.076        1.198         0.5063     0.5002 5.86e-03
## pH       -3.09            7.323        7.432         0.3841     0.3986 2.01e-03
## CL       -5.00            3.308        9.315         8.1438    13.5499 5.65e-07
## SO4      -6.26            6.118       12.046         5.7977    10.6776 3.75e-10
## CE       -6.28            1.260        2.326         0.9653     1.9135 3.34e-10
## RAS      -6.37            1.574        2.683         0.7476     1.9654 1.91e-10
## Nai      -6.66            0.646        1.282         0.2229     1.0770 2.72e-11
## PSI      -6.70            2.421        4.758         0.8059     3.9340 2.05e-11
## 
## $`2`
##         v.test Mean in category Overall mean sd in category Overall sd  p.value
## PSI       6.70            9.801        4.758         3.2030     3.9340 2.05e-11
## Nai       6.66            2.654        1.282         0.8950     1.0770 2.72e-11
## RAS       6.37            5.077        2.683         1.6146     1.9654 1.91e-10
## CE        6.28            4.625        2.326         1.3482     1.9135 3.34e-10
## SO4       6.26           24.837       12.046         6.9325    10.6776 3.75e-10
## CL        5.00           22.279        9.315        13.8108    13.5499 5.65e-07
## pH        3.09            7.667        7.432         0.3199     0.3986 2.01e-03
## Ki        2.76            1.462        1.198         0.3678     0.5002 5.86e-03
## dap       1.97            1.116        0.988         0.0856     0.3385 4.84e-02
## Nitrato  -3.22           27.231       38.033        12.4941    17.5144 1.26e-03
## MO       -4.91            2.745        3.211         0.2742     0.4970 9.13e-07
## C.       -4.91            1.596        1.867         0.1587     0.2890 8.96e-07
## N.       -4.95            0.137        0.161         0.0129     0.0248 7.41e-07
## 
##  1  2 
## 41 19

##         eigenvalue percentage of variance cumulative percentage of variance
## comp 1      3.7495                 37.495                              37.5
## comp 2      1.7251                 17.251                              54.7
## comp 3      1.0634                 10.634                              65.4
## comp 4      0.8683                  8.683                              74.1
## comp 5      0.7778                  7.778                              81.8
## comp 6      0.6904                  6.904                              88.7
## comp 7      0.5642                  5.642                              94.4
## comp 8      0.3565                  3.565                              98.0
## comp 9      0.1203                  1.203                              99.2
## comp 10     0.0844                  0.844                             100.0

## 
## Link between the cluster variable and the categorical variables (chi-square test)
## =================================================================================
##         p.value df
## chacra 4.32e-08  1
## 
## Description of each cluster by the categories
## =============================================
## $`1`
##          Cla/Mod Mod/Cla Global  p.value v.test
## chacra=M   100.0      75     50 7.17e-09   5.79
## chacra=B    33.3      25     50 7.17e-09  -5.79
## 
## $`2`
##          Cla/Mod Mod/Cla Global  p.value v.test
## chacra=B    66.7     100     50 7.17e-09   5.79
## chacra=M     0.0       0     50 7.17e-09  -5.79
## 
## 
## Link between the cluster variable and the quantitative variables
## ================================================================
##              Eta2  P-value
## RAS        0.7362 1.99e-18
## PSI        0.7254 6.39e-18
## CE         0.7181 1.38e-17
## MO         0.3569 4.69e-07
## pH         0.1477 2.43e-03
## dap        0.0807 2.78e-02
## Fungivoros 0.0684 4.36e-02
## 
## Description of each cluster by quantitative variables
## =====================================================
## $`1`
##            v.test Mean in category Overall mean sd in category Overall sd
## MO           4.59             3.42        3.211          0.426      0.497
## Fungivoros   2.01            44.70       39.567         28.097     27.765
## dap         -2.18             0.92        0.988          0.392      0.338
## pH          -2.95             7.32        7.432          0.389      0.399
## CE          -6.51             1.18        2.326          0.827      1.913
## PSI         -6.54             2.39        4.758          0.789      3.934
## RAS         -6.59             1.49        2.683          0.538      1.965
##             p.value
## MO         4.46e-06
## Fungivoros 4.46e-02
## dap        2.91e-02
## pH         3.16e-03
## CE         7.56e-11
## PSI        6.06e-11
## RAS        4.38e-11
## 
## $`2`
##            v.test Mean in category Overall mean sd in category Overall sd
## RAS          6.59             5.07        2.683         1.5742      1.965
## PSI          6.54             9.50        4.758         3.3916      3.934
## CE           6.51             4.62        2.326         1.3143      1.913
## pH           2.95             7.65        7.432         0.3224      0.399
## dap          2.18             1.12        0.988         0.0908      0.338
## Fungivoros  -2.01            29.30       39.567        23.9919     27.765
## MO          -4.59             2.79        3.211         0.3361      0.497
##             p.value
## RAS        4.38e-11
## PSI        6.06e-11
## CE         7.56e-11
## pH         3.16e-03
## dap        2.91e-02
## Fungivoros 4.46e-02
## MO         4.46e-06
## 
##  1  2 
## 40 20

## 
## Link between the cluster variable and the categorical variables (chi-square test)
## =================================================================================
##         p.value df
## chacra 3.96e-07  1
## 
## Description of each cluster by the categories
## =============================================
## $`1`
##          Cla/Mod Mod/Cla Global  p.value v.test
## chacra=M     100    71.4     50 9.35e-08   5.34
## chacra=B      40    28.6     50 9.35e-08  -5.34
## 
## $`2`
##          Cla/Mod Mod/Cla Global  p.value v.test
## chacra=B      60     100     50 9.35e-08   5.34
## chacra=M       0       0     50 9.35e-08  -5.34
## 
## 
## Link between the cluster variable and the quantitative variables
## ================================================================
##             Eta2  P-value
## SO4       0.7306 3.69e-18
## Nai       0.7031 6.29e-17
## CL        0.4994 2.80e-10
## N.        0.3360 1.22e-06
## C.        0.3225 2.22e-06
## Nitrato   0.2959 7.05e-06
## Ki        0.1685 1.12e-03
## Fitofagos 0.0983 1.47e-02
## 
## Description of each cluster by quantitative variables
## =====================================================
## $`1`
##           v.test Mean in category Overall mean sd in category Overall sd
## N.          4.45            0.170        0.161         0.0225     0.0248
## C.          4.36            1.975        1.867         0.2639     0.2890
## Nitrato     4.18           44.270       38.033        16.7779    17.5144
## Fitofagos  -2.41          122.548      139.017        83.0629    80.2418
## Ki         -3.15            1.064        1.198         0.4833     0.5002
## CL         -5.43            3.047        9.315         8.0173    13.5499
## Nai        -6.44            0.691        1.282         0.3356     1.0770
## SO4        -6.57            6.071       12.046         5.5926    10.6776
##            p.value
## N.        8.50e-06
## C.        1.29e-05
## Nitrato   2.94e-05
## Fitofagos 1.60e-02
## Ki        1.61e-03
## CL        5.69e-08
## Nai       1.19e-10
## SO4       5.19e-11
## 
## $`2`
##           v.test Mean in category Overall mean sd in category Overall sd
## SO4         6.57           25.987       12.046         5.4238    10.6776
## Nai         6.44            2.662        1.282         0.9409     1.0770
## CL          5.43           23.942        9.315        12.5053    13.5499
## Ki          3.15            1.512        1.198         0.3854     0.5002
## Fitofagos   2.41          177.444      139.017        57.0460    80.2418
## Nitrato    -4.18           23.480       38.033         7.9451    17.5144
## C.         -4.36            1.617        1.867         0.1616     0.2890
## N.         -4.45            0.139        0.161         0.0133     0.0248
##            p.value
## SO4       5.19e-11
## Nai       1.19e-10
## CL        5.69e-08
## Ki        1.61e-03
## Fitofagos 1.60e-02
## Nitrato   2.94e-05
## C.        1.29e-05
## N.        8.50e-06
## 
##  1  2 
## 42 18

¿Los índices de la comunidad de nematodos (MI, MI25, PPI y PI) son similares entre los lotes?

## 'data.frame':    236 obs. of  3 variables:
##  $ chacra : Factor w/ 2 levels "B","M": 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 ...
##  $ Indices: chr  "MI" "MI" "MI" "MI" ...
##  $ ind    : num  2.59 2.87 2.4 2.86 2.63 2.28 2.82 2.54 1.97 2.75 ...

## 
## Call:
## anosim(x = matrizIND, grouping = datos$chacra, permutations = 9999,      distance = "euclidean") 
## Dissimilarity: euclidean 
## 
## ANOSIM statistic R: 0.376 
##       Significance: 1e-04 
## 
## Permutation: free
## Number of permutations: 9999
## 
##  Multilevel pattern analysis
##  ---------------------------
## 
##  Association function: r.g
##  Significance level (alpha): 0.05
## 
##  Total number of species: 4
##  Selected number of species: 4 
##  Number of species associated to 1 group: 4 
## 
##  List of species associated to each combination: 
## 
##  Group B  #sps.  2 
##       stat p.value    
## MI25 0.433  0.0007 ***
## MI   0.337  0.0104 *  
## 
##  Group M  #sps.  2 
##      stat p.value    
## PPI 0.656   1e-04 ***
## PI  0.623   1e-04 ***
## ---
## Signif. codes:  0 '***' 0.001 '**' 0.01 '*' 0.05 '.' 0.1 ' ' 1